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    一文與您分享免疫球蛋白elisa試劑盒的兩種檢測模式

    發布時間: 2022-04-01  點擊次數: 146次
      免疫球蛋白elisa試劑盒是一種快速、靈敏、準確可靠的一種定量分析方法,樣本的處理對于ELISA實驗的成功有著舉足輕重的作用。利用其進行檢測的樣本類型包括常見的血液(血清、血漿),組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養上清以及不常見的皮膚組織。
      今天要為大家介紹的是免疫球蛋白elisa試劑盒的兩種檢測模式:
      1、雙雜交探針模式(FRET):FRET探針又稱雙雜交探針,FRET探針由兩條相鄰探針組成,在一條探針端標記FAM熒光基團,另一探針端標記Red640熒光基團。當復性時,探針結合在模板上,FAM基團和Red640基團相鄰,激發FAM產生的熒光,作為Red640基團的激發光被吸收,使Red640發出波長為640的熒光。當變性時,探針游離,兩基團距離遠,不能產生640波長的熒光。由于FRET探針是靠近發光,所以檢測信號是實時信號,非累積信號。
      2、交探針模式(Beacon):分子信標是一種呈發夾結構的莖環寡核苷酸探針,兩端的核酸序列互補配對,因此標記在一端的熒光基團與標記在另一端的淬滅基團緊緊靠近。熒光基團被激發后產生的光子被淬滅劑淬滅,由熒光基團產生的能量以紅外而不是可見光形式釋放出來。分子信標的莖環結構中,環一般為15-30個核苷酸長,并與目標序列互補;莖一般5-7個核苷酸長,并相互配對形成莖的結構。熒光基團標記在探針的一端,而淬滅劑則標記在另一端。在復性溫度下,因為模板不存在時形成莖環結構,當加熱變性會互補配對的莖環雙鏈解開,如果有模板存在環序列將與模板配對。與模板配對后,分子信標將成鏈狀而非發夾狀,使得熒光基團與淬滅劑分開。當熒光基團被激發時,因淬滅作用被解除,發出激發光子。由于是酶切作用的存在,分子信標也是積累熒光。

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